1、用试管制成斜面培养基 ， 并接种原始试管种（保留种，并用于生产的母种即为生产母种），可用于扩接原种 。
【木耳菌的陪养方法】2、综合马铃薯培养基 。先将马铃薯洗净去皮切成簿片，称取200克，加水1000毫升，煮沸15—20分钟 ， 用4层纱布过滤，取其滤液并补足水至1000毫升，加入琼脂20克，再加热 ， 琼脂溶化后，再加入其它配方中的药品 。
3、灭菌 。将分装后的试管扎捆好，放入高压蒸气灭菌锅 ， 在1公斤每厘米压力下灭菌20分钟，使微生物包括芽子色全部杀死 。待压力降到0度时，慢慢放出锅内气体，趁培养基没有凝固时，将试管摆成斜面 。
4、接种、培养 。通过无菌操作方法将菌种接入试管斜面上，置28摄氏度、3天后将温度降至24摄氏度继续培养 ， 12—15天左右 ， 菌丝长满整个试管斜面 ， 即成(生产)母种 。

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