1521年，曼努埃尔一世去世 。
1532—1533年，西班牙派遣皮萨罗征服南美洲的印加帝国 。
1540年，埃塞俄比亚国王达维特二世战死 ， 四百名葡萄牙志愿者发动了一次英雄主义的远征，拼死奋战，挽救了信仰基督教的埃塞俄比亚王国 。祭司王约翰的传说至此破灭 。
1543年，葡萄牙派遣船队首次到达日本 。
1570—1571年，印度多国联合向果阿岛和朱尔的葡萄牙人发动了一次大规模进攻 ， 但在城墙下失败溃散 。
1578年，葡萄牙国王塞巴斯蒂昂及其盟友（被废黜的摩洛哥苏丹阿卜杜拉·穆罕默德二世）在摩洛哥北部的三王战役中与摩洛哥苏丹马利克一世交战，葡军惨败，塞巴斯蒂昂丧命 。葡萄牙从此迅速衰落 。
1581年 ， 葡萄牙被西班牙吞并 。
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